FlashPure Plant miRNA Mini Kit

植物microRNA 快速提取试剂盒(免氯仿)

植物microRNA快速提取试剂盒（免lv仿）

目录号：91410

产品内容

自备试剂

无水乙醇

保存条件

室温（15 ~ 25℃）

产品简介

市场上常见的离心柱型的 RNA Kit/总 RNA Kit，不能有效吸附回收miRNA；Trizol 沉淀抽提法也不能有效沉淀回收全部 miRNA（生物通上有专题文章阐述）。

FlashPure Plant miRNA Mini Kit 是专用于提取各种植物组织的miRNA（包含 miRNA 的总 RNA），是通用型 microRNA 快速提取试剂盒（Cat#91015）的升级版，提取过程不再需要使用氯仿，并采用du有的gDNA过滤器，高效滤除基因组，得到包含 miRNA 的总 RNA，可直接用于miRNA 和 mRNA 的 RT、RT-PCR、RT-qPCR、RACE、芯片、测序等。

不但适用于普通植物，也适用于多糖多酚植物的根茎叶花，但是遇到糖酚含量巨丰富、次级代谢产物巨多的果实、种子、中草药等样本，应选用果实种子 microRNA 提取试剂盒（Cat#91400），效果更佳。

注意事项

1. 样品应避免反复冻融，否则会影响 RNA 的提取得率和质量。

2. 样品加入裂解液 MPA Plus匀浆后，样品可在–80℃保存一个月以上。

3. 取RNA样本时，把新鲜组织样本浸入 RNAsafe (RNA 样品保存液，91115-

100)中，可在 37℃保存一天，在 25℃保存一周，在 4℃保存一个月，在-20℃或者–80℃长期保存。

操作步骤（可得到包含miRNA 的总 RNA）

提示：

① 第一次使用前, 先在 Wash Solution 1、Wash Solution 2/3 中加入指ding量无水乙醇，详见瓶上的标签。

② 对于 RNA 酶或者多酚特别丰富植物组织：操作前在裂解液MPA Plus 中加入β-巯基乙chun至终浓度 1%，例如 1 ml MPA Plus 中加入 10μl β-巯基乙chun，此裂解液最好现用现配，配好 MPA Plus 4℃可放置一个月。

③ 所有离心步骤均需要在室温（15~37℃）下进行，提取效果更佳！

1. 在液氮中研磨植物组织成细粉，取≤60 mg细粉加入600μl裂解液MPA Plus，立即剧烈涡旋震荡 30 sec，充分混匀。

2. 将裂解物 13,000 rpm 离心 5 ~10 min，沉淀不能裂解的碎片。

3. 小心吸取上清（一般500μl），转入一个gDNA过滤器中（过滤器放入收集管中），13,000rpm离心1 min，保留滤液（RNA 在滤液中）。

4. 向滤液中加入 1.25 倍体积(一般 625μl )的无水乙醇，用移液器吹打混匀。

5. 每次转移≤750 μl滤液混合物至RNA吸附柱中，13,000 rpm离心1min，此时，RNA 被吸附在膜上，弃滤液。重复此过程，直到溶液全部上柱。

6. 加入 700 μl Wash Solution 1（检查是否已加入乙醇），室温放置1 min, 13,000rpm离心30sec，弃滤液。

7. 加入 500 μl Wash Solution 2/3（检查是否已加入乙醇），13,000 rpm 离心 30 sec，弃滤液。

8. 重复步骤 7。

9. 将 RNA 吸附柱放回空收集管中，13,000 rpm 离心 2 min，除去膜上残留的留乙醇。

10. 取出 RNA 吸附柱，放入一个新的 RNase-free 1.5 ml 离心管中，向 RNA吸附膜的中央悬空滴加 30-50 μl RNase-free H2O，室温放置 1 min，13,000 rpm 离心 1 min，管底即包含 miRNA 的总 RNA。

11. 得到 RNA/miRNA，可直接用于下游实验，或于-70℃保存，以免降解。

相关产品：

71418-25 Script III miRNA 1st Stand Synthesis Kit（加尾法）

71419-500 Script III miRNA Real-Time PCR Assay kit（for qPCR，加尾法）

71613-500 Script III miRNA RT-qPCR Detection kit（71418-25 + 71419-500）

植物microRNA快速提取试剂盒（免lv仿）