超速血液总RNA 提取试剂盒

FlashPure Blood Total RNA Kit

超速全血（液体样本）总RNA提取试剂盒

目录号：91213

产品内容

自备试剂

无水乙醇

保存条件

室温（15 ~ 25℃）

产品简介

采用RNAzol LS Reagent与吸附柱相结合提取总RNA的方法，简化了RNA 提取的流程，与经典的异丙醇沉淀法相比，柱式纯化方法简便，去除杂质能力更强，大大提高了RNA的纯度。该试剂盒可从各种血液、血浆、血清中快速提取总RNA，每个吸附柱每次可处理0.25ml液体样本或5~10×10⁶细胞。提取的总RNA没有DNA和蛋白的污染，可用于Northern Blot、Dot Blot、PolyA 筛选、体外翻译、RNase 保护分析和分子克隆。

产品特点

1. RNA 纯度更高；

2. 应用广泛：可提取多种不同的样本材料。

注意事项

1.血液RNA 的常温保存/运输/提取的简易方案：

临床取样：在临床上，使用抗凝管采血后，取250μl新鲜血液，加入 750μl的裂解液RLS(RNAzol LS Reagent，Cat#91012-100)，用移液枪反复抽打并振荡混匀，在室温裂解5~10min，直至血细胞充分发生裂解。

保存：经裂解后的血液可在-20℃下保存 1-2 个月，在-70℃保存半年。

运输：可冰袋4℃运输 1 天，干冰-20℃运输一周。

提取：后续RNA 提取按 R213（或 R012）的说明书进行。

2. 样品应避免反复冻融，否则会影响 RNA 的提取得率和质量。

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

操作步骤（所有离心步骤均可在室温下进行，不影响提取效果！）

操作前，请先在漂洗液RW、70%乙醇中加入无水乙醇，详见瓶身的标签。

1. 每250μl液体样品 (血清、血浆、脑脊液、冻存血等)，加入 750 μl裂解液 RLS，用移液器反复抽打几次，然后剧烈涡旋震荡，充分混匀。

（液体样品和裂解液 RLS 的终体积比总是 1：3）

2. 将匀浆样品在室温下放置 5 min，使得核酸蛋白复合物wan全分离。

3. 加入 200μl 氯仿，剧烈振荡 15 秒，并在室温下放置 2-3 分钟。

4. 12,000 rpm 离心 10 min。样品会分成三层：下层有机相，中间层和上层无色的水相，RNA 存在于水相中。水相层的容量大约为所加 RLS体积的 70%，转移上清至一个新的离心管中，进行下一步操作。

5. 向上清中加入等体积 70％乙醇（检查是否已加入乙醇），颠倒混匀。

6. 每次转移≤750 μl 上清混合液（包括沉淀）至 RNA 吸附柱中，12,000rpm 离心 1 min，倒弃滤液。重复此过程，直到溶液全部上柱。

7. 加入 500μl 去蛋白液 RE，12,000 rpm 离心 1 min，倒弃滤液。

8. 加入 500 μl 漂洗液 RW，12,000 rpm 离心 1 min，倒弃滤液。

（注意：漂洗液 RW 中按要求加入无水乙醇，用后立即盖紧瓶盖，以防乙醇挥发）

9. 可选步骤：重复步骤 8 一次。

10. 将RNA吸附柱放回空收集管中，12,000 rpm 离心2min，去除乙醇。

11. 取出RNA吸附柱，放入一个新的 RNase-Free 1.5 ml 离心管中，向吸附膜的中央加入 30~50 μl 的RNase-Free ddH2O，室温放置 2 min，12,000 rpm 离心 1 min。

（注意：如要要提高 RNA 浓度，可将得到的溶液重新加到吸附柱中，室温放置2 min，再次离心收集）

12. 提取的 RNA，可直接用于下游实验，或于-70℃保存，以免降解。

相关产品：

71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（for PCR or qPCR）

71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase（for qPCR）

71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (适用于所有qPCR仪)

超速全血（液体样本）总RNA提取试剂盒