通用型总RNA快速提取试剂盒 升级版核酸提取
采用 Trizol 试剂与离心吸附柱结合提取总RNA的方法，简化了RNA提取的流程，与经典的异丙醇沉淀法相比，柱式纯化方法简便，去除杂质能力更强，大大提高了 RNA 的纯度。该试剂盒可从各种细胞或组织（动物、植物、血液）中快速提取总 RNA，每个吸附柱每次可处理 50-100 mg 组织或5×106细胞，可同时处理大量不同样品。
通用型总RNA快速提取试剂盒 升级版核酸提取
诺博莱德 Universal Total RNA Kit通用型总 RNA 提取试剂盒
通用型总RNA快速提取试剂盒 升级版核酸提取
目录号：91013
产品内容
产品成份 |
91013-50 |
裂解液 RL |
50 ml |
去蛋白液 RE |
25 ml |
漂洗液 RW |
10 ml（需加入指ding量无水乙醇） |
RNase-Free ddH2O |
5 ml |
RNA 吸附柱和收集管 |
50 套 |
RNase-Free 1.5ml 离心管 |
50 支 |
RNase-Free 2.0ml 液氮研磨管 |
50 支 |
自备试剂
无水乙醇
保存条件
室温（15 ~ 25℃）
产品简介
采用Trizol 试剂与离心吸附柱结合提取总RNA的方法，简化了RNA提取的流程，与经典的异丙醇沉淀法相比，柱式纯化方法简便，去除杂质能力更强，大大提高了 RNA 的纯度。该试剂盒可从各种细胞或组织（动物、植物、血液）中快速提取总 RNA，每个吸附柱每次可处理 50-100 mg 组织或5×106细胞，可同时处理大量不同样品。一个小时内即可完成反应，提取的总RNA没有DNA和蛋白的污染，可用于Northern Blot、Dot Blot、PolyA 筛选、体外翻译、RNase保护分析和分子克隆。
产品特点
1. RNA 纯度更高；
2. 应用广泛：可提取多种不同的样本材料。
3. 本公司生产的 Universal Total RNA Kit 质量优异，可以wan美替代 Thermo的 TRIzol Plus RNA Purfication Kit。
4. 可在常温下提取 RNA，不需要 4℃离心机；亦可以兼容 4℃离心机。
注意事项
1. RNA 在裂解液 RL 中时不会被 RNase 降解，但后续处理过程中应使用不含RNase的吸头和玻璃器皿，璃器皿可在150℃烘烤4 h，塑料器皿可在 0.5 M NaOH 中浸泡 10 min，然后用水che底洗净，再高压灭菌。
2. 样品应避免反复冻融，否则会影响 RNA 的提取得率和质量。
3. 样品加入裂解液RL（RNAzol）匀浆后，加氯仿前，样品可在–80℃保存一个月以上。
4. 取RNA样本时，把新鲜组织样本浸入RNAsafe(RNA 样品保存液，91115-100)中，可在 37℃保存一天，在 25℃保存一周，在 4℃保存一个月，在-20℃或者–80℃长期保存。
具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准
操作步骤
第一次使用前，请先在漂洗液RW 中加入指ding量无水乙醇，详见瓶上的标签。
提示：所有离心步骤均可在室温（15~37℃）下进行，提取效果更佳！
1. 材料处理：
a．组织（动物、植物、真菌）：将组织在液氮中磨成细粉。每 30~50 mg 动物组织加 1ml 裂解液RL，每50~100 mg植物/真菌组织加 1ml 裂解液RL，涡旋 15sec。样品体积不应超过裂解液RL体积的10%。
b．单层贴壁培养细胞：吸去培养液，加入适量裂解液RL，每 10cm2 加1ml裂解液RL，用移液器抽打几次。
c． 细胞悬液：离心收集细胞，弃上清，每 5×106个细胞加1ml裂解液RL。加裂解液 RL 前不要洗涤细胞，以免降解mRNA。
d．血液：取新鲜血液，加入5倍体积裂解液RL，（推荐0.2ml血液+1 ml 裂解液 RL ），充分振荡混匀。
2. 将匀浆样品在室温下放置5min，使得核酸蛋白复合物wan全分离。
3. 可选步骤：12,000rpm 离心5min，转移上清至一新的离心管中。
（注意：如果样品中含有较多蛋白、脂肪、多糖或肌肉、植物结节部位等可加此步骤离心去除，离心得到的沉淀中含有细胞外膜、多糖、高分子DNA等，RNA 存在于上清液中）
4. 向上清（或裂解液混合液）中加入等体积的无水乙醇，混匀，此时可能会出现沉淀，每次将≤750ul溶液和沉淀一起转入RNA吸附柱中，12,000rpm离心1 min，倒弃滤液，若一次不能转移wan全，可分次转移。
5. 向吸附柱内加入500 ul 去蛋白液 RE，12,000 rpm 离心 1 min，倒弃滤液。
6. 向吸附柱内加入500ul漂洗液RW，12,000rpm离心1 min，弃滤液。
（注意：请检查漂洗液 RW 中是否已按要求加入无水乙醇！）
7. 重复步骤 6 一次。
8. 将RNA吸附柱放回空收集管中，12,000 rpm 离心 2min，甩干膜上残留的乙醇。
9. 取出RNA吸附柱，放入一个新的RNase-Free 1.5ml离心管中，向吸附膜的中央部位悬空滴加50~100ul RNase-Free ddH2O，室温放置2min，12,000 rpm离心1 min，管底即RNA溶液。
10. 提取的RNA可直接用于下游实验，或于-70℃保存，以防降解。
相关产品：
71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（for PCR or qPCR）
71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase（for qPCR）
71711-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (适用于所有 qPCR 仪)
通用型总RNA快速提取试剂盒 升级版核酸提取
