FITC标记套装

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更新时间：2024-08-24
厂家性质：经销商

本套装是将FITC标记的常用试剂集合为一体而成。适合于蛋白等含有氨基物质的标记。特别是抗体的标记。
如果待标记物分子量太小（如小于5KD），可能并不适合用此套装（主要是后期纯化去除未标记上的FITC，可选用透析袋）。

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FITC标记套装

P1150 FITC标记套装 NobleRyder一套640

FITC 标记套装

组成	规格	保存条件
FITC	10mg	-20 ℃
DMSO	10ml	RT
0.2M PH9.5 CB	100ml	2 －8℃
1M NH4Cl	1ml	2 －8℃
Sephadex G-25	100ml（约50%含量）	2 －8℃
层析空柱（10ml）	一套	RT
透析袋 MD25（8000-14000）	20CM	2 －8℃
铁夹（夹透析袋）	两支	RT

保存条件 ：FITC -20度保存，其他常温保存。

产品说明 ：本套装是将FITC标记的常用试剂集合为一体而成。适合于蛋白等含有氨基物质的标记。特别是抗体的标记。

如果待标记物分子量太小（如小于5KD），可能并不适合用此套装（主要是后期纯化去除未标记上的FITC，可选用透析袋）。

标记原理 ：在高 PH 下 FITC 可蛋白等分子的氨基相连，形成共价健。

操作方法：

一，标记量的计算：FITC 分子量为 389.4 。一般为 FITC ：待标记物＝ 10 ： 1 左右。比如抗体 IgG 分子量一般为 150 － 160KD 。则 1mg HRP 可标记抗体 40mg 之间。

二，计算好各步反应时间。作好开始标记的准备工作。因为标记是在 PH 为 9.5 的条件下反应，如果待标记物本身盐含量很低并且缓冲力差，如生理盐水，可等二天再准备。如果不确定，将 0.2M PH9.5 CB 稀释 20 倍，作为透析液，将待标记物装入透析袋中 4 ℃透析过夜，透析袋适当留长约 1ml 体积的量以备第二天加入酶（透析袋用双蒸水清洗三次，祥细使用请见附录）。

三，如果样品缓冲能力很小（固体可用水溶解），加入 1/20 体积的 0.2M PH9.5 CB ，混匀。

四，准备层析柱（使用方法见附录）。

五，在样品准备好的情况下，称量 2mg 左右 FITC （请不要一次称量过小，称量过小时，误差会很大），加入 1ml DMSO 溶解。取适量溶解好的 FITC ，加入准备好的样品迅速混匀。避光常温反应两小时或者 4 ℃反应过夜。

六，过柱。请保证总溶液体积不超过总体积的1/5。比较理想的是在1/10。也就是10ml凝胶，zui多过柱1ml的标记液（此步也可以改为透析。一般避光透析两天左右，到没有明显黄色出来为止）。。

七，加入1/20体积的1M NH4Cl，避光4℃反应两小时

附透析袋使用方法：

本透析袋已预处理过，用双蒸水清洗后将水用适当吸一下。就可直接使用。透析袋上下都可以用铁夹，但如果铁夹不够用，下部可用细线或者其他的透析袋夹。

将透析袋轻轻的折上两到三折。用线或者透析袋夹封住，上面支开，加入待透析物，留一定量的空气在顶上，并小心的折一折，用铁夹夹住，轻轻的挤压，如没发现有液体流出，可放入透析液中。一般透析可用纯净水瓶去顶使用。用一次性筷子或者其他合适物穿过铁夹，将透析袋吊在透析液中，补充透析液，使透析液盖过透析袋中的液面而不要淹过铁夹下面。

分子筛柱使用方法：

取空柱，加入双蒸水冲洗三次，找一合适的地方架好，下面收集废液，将 Sephadex G-25 取出摇匀，轻轻的沿壁倒入柱中（用去尖移液器加入也可以），等液体流出少量时，不停的补加凝胶到一合适的体积。一般加到10ml左右。在上口留出1－2ml空间。灌完胶后，用三倍体积的双蒸水冲洗（从上面加入，下面自动流出），再用合适的缓冲液冲洗三倍体积（如生理盐水或者PBS等）。

当zui后一次加缓冲液后，把柱上层弄平整。等上层溶液*流完，就可以加入待过柱的标记液。用去尖吸头小心的中空滴加，如果一次加不完，等流出少量后再加，一直加完。待标记物*流干后，再加入少量约3－5滴缓冲液（如生理盐水或者PBS等），流完再加，如此三次左右，接着就可以一次加入1－2ml缓冲液（如生理盐水或者PBS等）。加到一定体积后，可以看到柱中黄色会分层。收集下层溶液，加入适当的稳定剂等，定溶。备用。

用过的凝胶可以丢弃或者重复使用（如果重复使用，须用大量的缓冲液冲洗，待上层黄色*流走。折中的方法是小心的将上层黄色胶挖掉。流下层的回收）

P0910	0.01M PBS（干粉） PH7.2-7.4	NobleRyder	2L	8.00
P0930	0.1% 胰蛋白酶液消化液	NobleRyder	10ml	120.00
A0970	10 ×多聚赖氨酸溶液（免疫组化）	NobleRyder	10ml	260.00
A0980	4 ％多聚甲醛	NobleRyder	100/500ml	60.00/200.00
A0940	AEC 显色试剂盒（20×）	NobleRyder	1ml/10ml	100.00/400.00
A0960	BCIP/NBT 显色试剂盒	NobleRyder	100ml	380.00
A0950	DAB 显色试剂盒（20×）	NobleRyder	3ml	100.00
P1150	FITC 标记套装	NobleRyder	一套	640
P0010	Mayer'; 苏木素染液	NobleRyder	10ml/100ml/500ml	60.00/240.00/680.00
P1140	抗体稀释液（一抗稀释液）	NobleRyder	10ml/100ml	40/280
A0990	抗荧光衰减封片剂	NobleRyder	5ml/25ml	70.00/240
P1100	辣根过氧化物酶（HRP）标记套装	NobleRyder	一套	560
P0020	柠檬酸钠缓冲液0.01mol/L，pH6.0，	NobleRyder	1L	8.00

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