DNA退火缓冲液
本Annealing Buffer可以用于DNA oligo退火,不可用于RNA oligo 的退火。退火后产物可以直接和经酶切、纯化的质粒连接。通常转化后可以得到大量的阳性克隆。
DNA退火缓冲液
D0110DNA退火缓冲液NobleRyder 5ml 80.00
本公司供应化学试剂的DNA退火缓冲液,*,欢迎洽谈。
简介:本Annealing Buffer可以用于DNA oligo退火,不可用于RNA oligo的退火。退火后产物可以直接和经酶切、纯化的质粒连接。通常转化后可以得到大量的阳性克隆。
保存条件:
-20℃保存,一年有效。
操作步骤
1.把要退火的DNA oligo用经灭菌的三蒸水配制成50μM。解冻Annealing Buffer for DNA Oligos(5X),混匀备用。如经常使用,本Buffer可放置2-8℃一个月。
2.如下设置退火反应体系:
Annealing Buffer for DNA Oligos(5X) |
20μl |
DNA oligo A(50μM) |
20μl |
DNA oligo B(50μM) |
20μl |
Nuclease-Free Water |
40μl |
总体积 |
100μl |
按照上述顺序依次加入各种试剂,混匀。放入PCR仪。
3.如下设置PCR仪进行退火反应:
步骤 |
温度 |
时间 |
说明 |
1 |
95℃ |
2分钟 |
让oligo充分变性 |
2 |
每8秒下降0.1℃,降至25℃(注1) |
约90分钟 |
退火 |
3 |
4℃ |
长时间保持 |
暂时存放 |
注1:如果所用的PCR仪不具备下降0.1℃的功能,也可以设置为每90秒下降1℃。
4.退火结束后可以直接用于连接反应,也可以在-20℃冻存备用。如果退火结束后打算进行酶切等其它反应,用纯化试剂盒进行纯化,或者确保退火产物在反应体系中体积不超过10%,以避免AnnealingBuffer对后续的酶反应体系的干扰。
货号 |
产品名称 |
品牌 |
规格 |
价格(元) |
D0963 |
2×Pfu PCR MasterMix (不含染料) |
NobleRyder |
1ml/10ml |
160.00/1200.00 |
D0962 |
2×Pfu PCR MasterMix (含染料) |
NobleRyder |
1ml/10ml |
160.00/1200.00 |
D0961 |
2×Taq PCR MasterMix (不含染料) |
NobleRyder |
1ml/10ml |
80.00/580.00 |
D0960 |
2×Taq PCR MasterMix(含染料) |
NobleRyder |
1ml/10ml |
80.00/580.00 |
D0965 |
2×Taq Plus PCR MasterMix (不含染料) |
NobleRyder |
1ml/10ml |
120.00/1000.00 |
D0964 |
2×Taq Plus PCR MasterMix (含染料) |
NobleRyder |
1ml/10ml |
120.00/1000.00 |
D0110 |
DNA退火缓冲液 |
NobleRyder |
5ml |
80.00 |
D0973 |
dNTP(10mM) |
NobleRyder |
1ml |
80.00 |
D0974 |
dNTP(2.5mM) |
NobleRyder |
1ml |
40.00 |
D0951 |
Pfu DNA Polymerase |
NobleRyder |
500U/2500U |
180.00/720.00 |
D0033 |
SYBR Green I(20×)定量PCR用 |
NobleRyder |
1ml |
120.00 |
R0928 |
SYBR Green II(10000×) |
NobleRyder |
100ul |
520.00 |
D0950 |
Taq DNA Polymerase |
NobleRyder |
1000U/5000U |
80.00/320.00 |
D0952 |
Taq Plus DNA Polymerase |
NobleRyder |
500U/2500U |
140.00/560.00 |